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飞哥 小李探花的生物课堂 2025年03月04日 20:31 江苏 前面写了一篇关于PCR引物的教学反思，他是解决PCR问题的关键(【教学反思】PCR教学时的最关键点是什么？)，在此基础上，进行扩展延伸，看看重叠延伸PCR，有什么应用？ 本次教学反思对应的课件和文档会放在群文件里，注意自行下载！ 关键是3'端要出现互补序列，互为模板。 原因是：DNA聚合酶只能从引物的3’端添加游离的脱氧核苷酸，进行子链的延伸。
其应用主要有三个方面： ①定点突变 ②融合基因或DNA片段 ③将外源的基因或DNA片段添加到已知序列中 总之要画图……
关于应用①：定点突变
产物AB和产物CD中选择哪条链进行重叠PCR的标准是什么？ 讲清楚上面这张ppt中的问题就把定点突变讲清楚了。
关于应用②：融合基因或DNA片段 问号处互补的两条链有几种情况？若要进一步延伸哪种才符合要求？
关于应用③：将外源的基因或DNA片段添加到已知序列中 在①所在的PCR1中第__次循环后可以得到新霉素抗性基因。 在②所在的PCR2和PCR3中第__次循环后可以得到H1和H2。 在④所在的PCR5中用到的引物是__________。判断的关键依据是？
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