如果用秋水仙素处理有丝分裂的细胞,纺锤体会迅速消失,细胞停滞在有丝分裂中期,染色体无法分离成两组。用秋水仙碱进行诱导,从而将细胞阻断在细胞分裂中期,也是诱导细胞周期同步化的重要方法之一。
很多教师和学生在教学中都会有困惑,纺锤体的组装是在细胞分裂的前期,为什么用秋水仙素处理细胞分裂不是停滞在前期而是中期?
笔者认为,这与细胞周期运转调控密切相关。真核细胞周期可分为4个时期,分别是G1期、S期、G2期和M期。在细胞周期调控中主要有3个控制点第一个控制点在G1期,决定细胞能否进入S期:第二个控制点在G2期,决定细胞能否进入有丝分裂期;第三个控制点在M期,决定细胞是否已经准备好将复制好的染色体拉向两极。
CDK(周期蛋白依赖性蛋白激酶)对细胞周期运行起着核心性调控作用,CDK与不同时期的周期蛋白结合会在特定周期起调节作用。例如,与M期周期蛋白结合的CDK在M期起调节作用cyclinA、 cyclinB是在M期起调节功能的两种主要周期蛋白。细胞周期运转到分裂中期后,在后期促进复合物(APC)的作用下,M期 cyclinA和 cyclinB通过泛素化途径迅速降解,Cdk1活性丧失,细胞周期便从M期中期向后期转化。APC活性变化是细胞周期由分裂中期向后期转换的关键因素,其活性受到多种因素的综合调节,纺锤体组装检查点是其重要的调控因素。纺锤体组装不完全,或所有动粒不能被动粒微管全部捕捉,则APC不能被激活。综上,用秋水仙素处理有丝分裂的细胞,纺锤体微管因不能组装而无法捕捉到动粒,APC无法被激活,导致 cyclinA和 cyclinB不能降解,Cdk1仍然保持活性,靶蛋白无法去磷酸化,M期中期无法向后期转化,从而使细胞停滞在中期。但有资料表明,去除秋水仙素的影响,细胞又会恢复纺锤体的组装,从而使细胞完成细胞周期。笔者认为,细胞停滞在中期应该是从分裂时相的角度来说的,也是染色体螺旋化程度最高的时期。作为中期的标志性特征之一,正常情况下所有染色体都整列在细胞中央的赤道板上,用秋水仙素处理后,将会很难整齐排列在赤道板,在细胞中会散乱分布。
用概念图表示中期到后期的变化
来源:
中学生物教学 (2021年10月) “细胞分裂”教学中的“纺锤体”释疑(作者:杨忠顺)节选 |