江苏省仪征中学2021-2022学年度第二学期高二生物学科导学案

 1.2 发酵工程的无菌技术（3）   

研制人：余荣娟    审核人：宣雯雯

班级：____________姓名：____________学号：________授课日期：2022年月日

【本课在课程标准里的表述】概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法；概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法

【学习目标】

【学习内容】

【导学】

一、平板划线法

1.概念：是指把含有多种微生物的______样品，通过在特定的琼脂平板表面_____________，从而获得____________的方法。

2.具体做法：将微生物样品在琼脂平板表面多次做“____________”的稀释划线，经过这样的操作可得到较多独立分布的_________微生物。

3.操作步骤

4.平板划线操作中三种灼烧的目的不同

二、稀释涂布平板法

1.具体做法：将待分离的材料做一系列的___________，再取一定量的某一稀释度的菌液___________，然后用无菌的___________将菌液均匀地涂布在整个平板表面，使其中的微生物_________分散，培养后在平板培养基表面形成多个单菌落。

2.应用：既可用于菌种的_______________，也可以用于微生物的______。

3.混合平板法：将稀释的少量菌悬液与__________左右的培养基混合均匀后倒入无菌培养皿中，再将培养皿置于合适温度下培养，这样在培养基表面和内部均可长出______________。

4.平板划线法的缺点是不能___________，而___________________则能用于微生物的计数。

5.计数依据：如果经稀释涂布平板法培养出的都是____________增殖形成的菌落，那么统计这些_______的数目，即可计算出单位体积样品中的微生物数量。

6.实验：分离土壤中分解尿素的细菌并进行计数

(1实验原理

①利用__________培养基可以筛选和分离某种微生物。

②在____________的条件下，于固体培养基上培养该微生物，形成_______菌落。单个菌落即为___________，通过对菌落数量的统计，可以计算出样品中的含菌数。

（2）实验步骤

【导思】

1.关于平板划线法：

（1）平板划线法接种菌种时，哪些操作可防止杂菌污染？

（2）在琼脂平板表面多次做“由点到线”的稀释划线的目的是什么？

（3）接种操作完成后，需将平板倒置放入培养箱中培养，此时倒置的目的是什么？

（4）若在培养基上观察到不同形态的菌落，原因是什么？

2.甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。

（1）甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230，该同学的统计结果不可靠(填“可靠”或“不可靠”)，若不可靠，应如何改进？

（2）乙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学将21舍去，然后取平均值。该同学对实验结果的处理____________(填“合理”或“不合理”)。微生物计数时，如果实验中出现重复实验的结果差别很大的情况，应___________________________________，找出差异的原因，而不能简单地将结果舍弃后进行计数。

（3）某同学在三种稀释度下吸取0.1 mL的菌液涂布平板，统计菌落数，得到以下的数据，试计算1 g样品的活菌数。

（4）为什么统计的菌落数往往比活菌的实际数目低？

【导练】

1．下列关于倒平板的叙述，错误的是(　　)

A．待培养基冷却至50 ℃左右时倒平板

B．倒平板整个过程应在酒精灯火焰旁进行

C．完全打开培养皿皿盖，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖

D．为避免水滴滴入培养基，平板应倒过来放置

2.微生物接种的方法很多，平板划线法是常用的一种。如图是平板划线示意图，划线的顺序为①②③④。下列相关叙述错误的是(　　)

A．划线操作时，将挑有菌体的接种环插入培养基

B．平板划线后培养微生物时要倒置培养

C．不能将第④次的划线与第①次的划线相连

D．在第②～④次划线前都要对接种环进行灭菌

3．用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中得到以下几种统计结果，其中正确的是(　　)

A．涂布了1个平板，统计的菌落数是230

B．涂布了2个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238

C．涂布了3个平板，统计的菌落数分别是13、234和254，取平均值167

D．涂布了3个平板，统计的菌落数分别为210、240和250，取平均值233

4．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是(　　)

①加尿素　②不加尿素　③加琼脂　④不加琼脂　⑤加葡萄糖　⑥不加葡萄糖　⑦加硝酸盐　⑧不加硝酸盐

A．①③⑤⑦   B．②④⑥⑧

C．①③⑤⑧   D．①④⑥⑦

【课后反思】

江苏省仪征中学2021-2022学年度第一学期高二生物学科作业

1.2 发酵工程的无菌技术（3）    

研制人：余荣娟    审核人：宣雯雯

班级：__________姓名：__________学号：__________时间：__________作业时长：30分钟

一、单选题

1. 下列有关用平板划线法接种的操作，错误的是(　　)

A. 将接种环放在火焰上灼烧

B. 用已冷却的接种环挑取菌体

C. 用取菌体和划线都要在火焰旁进行

D. 接种环划线要将最后一区的划线与第一区的划线相连

2. 下列有关微生物的分离与培养的叙述，错误的是(　　)

A. 获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染

B. 倒置平板可防止培养皿盖上的冷凝水滴落造成污染

C. 倒平板时将培养皿的盖拿开，以便于将锥形瓶中的培养基倒入培养皿

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