江苏省仪征中学2021-2022学年度第二学期高二生物学科导学案

1.2 发酵工程的无菌技术（2）

研制人：刘飞    审核人：宣雯雯

班级：____________姓名：____________学号：________授课日期：2022年  月  日

【本课在课程标准里的表述】阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术

【学习目标】

【学习内容】

【导学】

一、发酵工程的无菌操作器具

1.接种器具

（1）接种：在_______条件下将微生物转入_______的操作过程。

（2）常用接种器具包括玻璃涂布器、_______、接种环等。

（3）应用：玻璃涂布器常用于_______接种，接种针用于_______接种，接种环用于_______接种或在平板培养基上_______接种。

2.转移器具

（1）移液管的应用：一般用于转移部分_______培养物、_______微生物或_______化学试剂。

（2）刻度移液管：具有_______的直形玻璃管，在需要控制试剂_______时使用。

（3）使用要点

a．以拇指及中指捏住管颈标线_______的地方，将移液管插入待取溶液液面下约1 cm。

b．移液管不应伸入太多，以免管尖外壁粘有_______溶液；也不应伸入太少，以免液面下降后而_______。

（4）操作步骤

a．应用：取液量_______时(如0.1 mL)使用。

b．类型：分为固定容量的和_______容量的两种。

3.超净工作台

（1）概念：超净工作台是一种经过_______净化而形成高洁净操作环境的设备。

（2）净化原理：是利用工作台内_______的杀菌作用，并通过_______过滤确保工作台内空气的无菌、无污染。

（3）注意事项：超净工作台开机杀菌30 min后，需先关掉_______，约_______后方可使用。

（4）优点：操作方便。

二、微生物接种和传代的无菌技术

1.菌种的传代和保存要考虑菌种的_______、_______特性，尽量让菌种在人工创造的条件下，_______细胞的代谢水平，使细胞基本处于休眠状态，即微生物的生长繁殖受到抑制但又不至于_______。

2.菌种保存的重要条件：______________。

3.穿刺接种和斜面接种

(1)厌氧微生物接触氧气会受到抑制、损伤甚至死亡，常采用_______接种。

(2)_______是常用的菌种传代和低温下保存菌种的方法。

4.斜面接种和培养酵母菌

准备接种→接种环_______→试管口_______→挑取菌体→_______→培养

5.菌种保存

(1)步骤：挑选典型菌落→接种在斜面培养基上→培养使其_______生长→试管用牛皮纸包扎→置于_______左右的冰箱中保存(目的：减缓培养基的_______，延长_______)。

(2)每隔2～3个月_______接种一次，再继续保存。

【导思】

1．下图接种方法分别是什么？

2．在斜面接种和培养酵母菌的过程中有哪些无菌操作的步骤？

【导练】

1．下列关于斜面接种和培养酵母菌的叙述，错误的是(　　)

A．接种环灭菌时，只需将其环端进行灭菌

B．接种时，应在培养基斜面上由底部向上轻轻划“Z”型折线

C.挑取菌体时应先将接种环的环部接触培养基斜面顶端或其他无菌体的培养基部位使其冷却

D．将菌种置于4 ℃左右的冰箱中保藏即有利于减缓培养基的水分蒸发，又有利于延长保存时间

2．下列关于微生物接种和传代的无菌技术的叙述，错误的是(　　)

A．菌种的传代和保存要考虑菌种的生理、生化特性

B．低温、干燥、缺氧、缺乏营养等环境条件都有抑制微生物生长和代谢的作用

C．破伤风芽孢杆菌可在培养基深处的厌氧环境下生长

D．在培养基斜面上接种时应由上部向底部轻轻划“Z”型折线

【课后反思】

江苏省仪征中学2021-2022学年度第二学期高二生物学科作业

1.2 发酵工程的无菌技术（2）

研制人：刘飞    审核人：宣雯雯

班级：__________姓名：__________学号：__________时间：__________作业时长：30分钟

一、单选题

1．下列关于微生物接种和传代的描述，错误的是(　　)

A．抽出接种环时，其带菌部位不要触及管壁或通过火焰，以免被杂菌污染或被杀死

B．用斜面培养基保存菌种通常每隔2～3个月重新接种一次

C．休眠状态即微生物的生长繁殖受抑制但又不至于死亡

D．穿刺接种用到的接种器具是接种环

2.下列有关消毒与灭菌的说法，正确的是(   )

①日常生活中经常用到的消毒法是煮沸消毒法

②对接种室、接种箱或超净工作台要使用巴氏消毒法进行消毒

③实验操作者的双手使用酒精进行灭菌

④接种环、接种针等金属用具常使用灼烧法进行灭菌

⑤培养基常使用高压蒸汽灭菌法进行灭菌

A.①②③ B.③④⑤ C.①②③④⑤ D.①④⑤

3.工业化大规模制酒时，可能需要将菌种扩大培养，下列有关说法正确的是(   )

A.应将菌种接种至固体培养基中

B.最后应使用蛋白胨、酵母提取物等物质制备成LB培养基培养菌种

C.接种操作工具一般都选择高压蒸汽灭菌锅灭菌

D.在超净工作台上进行接种工作时，应关闭事先打开的紫外灯

4.下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是